1.服務簡介S-004
北京邁凱迪生物提供哺乳動物細胞表達服務。哺乳動物細胞表達系統在表達過程中有翻譯后修飾和折益的功能,這一特點使其蛋白更接近天然蛋白,具備天然蛋白必須的空間結構和修飾,與天然蛋白有相同的生物活性。哺乳動物細胞表達系統在功能蛋白、抗體生產、臨床疫苗的研發和生產中應用較多。
2.服務內容
北京邁凱迪生物可提供多種表達服務,包括瞬時轉染表達、重組抗體表達生產、穩定細胞株構建服務。北京邁凱迪生物提供無血清懸浮培養的多種哺乳細胞表達系統,同時提供商業化轉染體系為客戶提供多種選擇;邁凱迪生物擁有一套經過反復驗證的載體-細胞-轉染高效表達體系,可以輕松獲得抗體的穩定性克級生產;可提供蛋白及抗體藥物研發生產服務。我們可提供一站式服務,包括基因優化(密碼子優化)、蛋白結構分析與表達方案設計、瞬時轉染、穩定細胞株構建、重組抗體生產、數據分析。
3.實驗原理
構建的質粒(環狀質粒)導入到培養好的細胞內,將構建好的質粒酶切(質粒線性化),線性化后的質粒導入到定向馴化培養好的宿主細胞后,線性化的質粒能夠和細胞自身的基因組整合,隨著細胞的生長分裂能夠穩定的表達,這個過程就叫做穩定轉染。因為質粒整合到細胞基因組上是一個相對隨機的過程(可以人為干預,促進其成功率),有的質粒未能成功的進行同源重組,有的重組成功也不能穩定遺傳,且重組后的狀態也有幾種,因此,在其重組后進行不斷的加壓篩選(這就是細胞系構建時間長的原因),篩選出能夠穩定表達蛋白的細胞株,這就是穩定細胞株的篩選。經過成功篩選的細胞株,直接培養可以大量的生產目的蛋白,雖然前期耗時較長,但節約了后續大規模培養的時間。(可以先嘗試瞬時轉染得到少量蛋白,檢測后再進行穩定細胞系構建)。